近日，《科學(xué)進(jìn)展》雜志發(fā)表我國(guó)學(xué)者論文，其上登載了一張“藥物擊靶”顯微鏡照片。照片顯示：當(dāng)藥物分子(硫黃素T)要與生命體內(nèi)的靶蛋白結(jié)合、起藥效時(shí)，不是單個(gè)分子去結(jié)合蛋白，而是自動(dòng)像樂(lè)高積木一樣組裝后，合力“擊靶”，這種“機(jī)靈勁兒”與之前人們的想象完全不同。
這個(gè)新發(fā)現(xiàn)可能帶來(lái)哪些顛覆性改變?為什么之前沒(méi)拍到過(guò)這樣的照片?藥物分子又靠什么像樂(lè)高積木一樣組裝?帶著這些問(wèn)題，科技日?qǐng)?bào)記者專(zhuān)訪了論文通訊作者之一的中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所(以下簡(jiǎn)稱(chēng)醫(yī)科院基礎(chǔ)所)副研究員王晨軒。
首張顯微照片能傳遞哪些信息?
照片中兩位主角硫黃素T和淀粉樣蛋白以寡聚體的結(jié)構(gòu)結(jié)合，為藥物分子能像樂(lè)高積木自動(dòng)組裝拼接提供了最好證據(jù)。
“教科書(shū)中有一個(gè)經(jīng)典的‘鎖鑰模型’，是說(shuō)藥物分子必須要和蛋白嚴(yán)絲合縫才能夠‘擊靶’，像一把鑰匙開(kāi)一把鎖，但現(xiàn)在的顯微鏡觀測(cè)結(jié)果表明，藥物分子用寡聚態(tài)的方式工作，或許只需要半把鑰匙就能開(kāi)鎖。”王晨軒對(duì)記者介紹，這是科學(xué)家首次直觀看到“藥物擊靶”的狀態(tài)，可用于指導(dǎo)藥物分子的設(shè)計(jì)。
先說(shuō)這張照片的主角。它們是藥物分子硫黃素T，和它的靶點(diǎn)分子——胰淀素蛋白(淀粉樣蛋白的一種)。為什么選擇這兩個(gè)主角做研究?王晨軒說(shuō)，作為生命大分子，蛋白質(zhì)一旦出錯(cuò)經(jīng)常會(huì)“纏繞”錯(cuò)亂，從正確的折疊構(gòu)象向錯(cuò)誤的折疊構(gòu)象轉(zhuǎn)變，最后形成淀粉樣沉淀，導(dǎo)致淀粉樣蛋白和很多疾病相關(guān)。
人們最耳熟能詳?shù)牡矸蹣拥鞍资?beta;-淀粉樣蛋白，它被發(fā)現(xiàn)在老年癡呆癥患者的神經(jīng)細(xì)胞中頻繁出現(xiàn)，很多藥企花巨資想研究怎么讓這些淀粉樣沉淀消失，至今都沒(méi)有成功。
還有Ⅱ型糖尿病、亨廷頓舞蹈癥等，這些疾病中都有淀粉樣蛋白的身影。因此研究它們與藥物分子的作用機(jī)理對(duì)很多疾病的治療有幫助。
硫黃素T正是能和這些“病態(tài)”淀粉樣蛋白特異性結(jié)合的分子，而且它還有顯色的優(yōu)勢(shì)。這對(duì)照片上的主角，實(shí)際上背后關(guān)聯(lián)的是很多現(xiàn)在沒(méi)有治療辦法的疾病。
照片中的主角干啥了?硫黃素T兩兩成對(duì)、湊四成團(tuán)、甚至六人成伍。用學(xué)術(shù)的說(shuō)法是：研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)硫黃素T在受體蛋白表面上的結(jié)合結(jié)構(gòu)以四種寡聚態(tài)存在，即二聚體(頭尾相接)、二聚體(肩并肩相接)、四聚體、六聚體。
看到這樣一幕為啥要激動(dòng)?這就是藥物分子能像樂(lè)高積木組裝拼接的最好證據(jù)!
沒(méi)看到顯微照片之前，人們要么認(rèn)為藥物分子只能“單著”，要么靠“盲算”揣測(cè)它們的結(jié)合，但是壓根沒(méi)證據(jù)，也就更無(wú)法指導(dǎo)實(shí)踐了。而現(xiàn)在，藥物設(shè)計(jì)者可以大膽地將選擇性寡聚效應(yīng)應(yīng)用于藥物分子的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)與優(yōu)化中，通過(guò)理解藥物的寡聚化機(jī)理并操縱寡聚結(jié)構(gòu)，以藥物團(tuán)簇而不是藥物單分子為“單元”靶向受體蛋白。
怎么拍出來(lái)的?為什么以前拍不出來(lái)?
之前的設(shè)備和方法達(dá)不到要求。這次勇?lián)厝蔚膾呙杷淼里@微鏡，記錄了穿越樣品的電子直接捕捉蛋白質(zhì)和藥物分子的“模樣”。
蛋白質(zhì)的照片拍攝困難。科學(xué)家先是用晶體衍射法，再用冷凍電鏡的方法，但是至今仍不是所有的蛋白都能拍攝成功。原因必須要讓蛋白排列成有序的陣列，才能滿(mǎn)足成像要求。
“這就好比，只有閱兵式上的解放軍方陣才能成像，而后面的群眾大聯(lián)歡方陣是拍不上的。”王晨軒打了個(gè)形象的比方，因此要拍攝和藥物分子結(jié)合的蛋白分子，就要用新的拍攝設(shè)備。
掃描隧道顯微鏡勇?lián)厝巍?ldquo;它最初是物理學(xué)家用來(lái)探測(cè)原子、亞原子微觀結(jié)構(gòu)的工具，具有超高的分辨率。”王晨軒說(shuō)，把物理設(shè)備引進(jìn)生物領(lǐng)域是上世紀(jì)90年代的事情，需要完成對(duì)設(shè)備的硬件、軟件、算法的全新研制，中國(guó)團(tuán)隊(duì)在國(guó)際上是較早進(jìn)入這一領(lǐng)域的。
掃描隧道顯微鏡是通過(guò)量子力學(xué)中的隧穿效應(yīng)，記錄穿越樣品的電子直接捕捉蛋白質(zhì)和藥物分子的“模樣”。因此最開(kāi)始的掃描隧道顯微鏡操作必須在真空中進(jìn)行。
中國(guó)科學(xué)家團(tuán)隊(duì)很早解決了常態(tài)下用掃描隧道顯微鏡觀測(cè)的問(wèn)題，在世界上首次使用它，實(shí)現(xiàn)了在常溫常壓下對(duì)化學(xué)分子的觀察。
“經(jīng)過(guò)幾代學(xué)者持續(xù)改造設(shè)備、開(kāi)發(fā)新的數(shù)據(jù)采集方法，它的實(shí)力才充分展現(xiàn)。”王晨軒說(shuō)。
為了拍攝首張“藥物擊靶”顯微鏡照，醫(yī)科院基礎(chǔ)所王晨軒、于蘭蘭、張文博，與國(guó)家納米科學(xué)中心的王琛、楊延蓮、方巧君等幾代科研人打磨多年，不僅發(fā)明了蛋白質(zhì)對(duì)基底的吸附技術(shù)、分子伴侶的固定技術(shù)、掃描探針的脈沖技術(shù)等一系列專(zhuān)利技術(shù)，還對(duì)整個(gè)“拍照”的流程進(jìn)行了摸索和優(yōu)化。
“整套(拍照)技術(shù)非常復(fù)雜，很難形成照搬流程，專(zhuān)業(yè)人員可能需要一年或者幾年的訓(xùn)練時(shí)間才能系統(tǒng)掌握。”王晨軒說(shuō)。
俗話說(shuō)，“臺(tái)上一分鐘，臺(tái)下十年功”。首張“藥物擊靶”顯微鏡照不僅凝結(jié)了幾代人在這一領(lǐng)域的經(jīng)驗(yàn)積累，而且集結(jié)了生物、物理、成像等多學(xué)科人才多年創(chuàng)新的成果。
看到藥物分子會(huì)“玩樂(lè)高”有什么意義?
為簡(jiǎn)化現(xiàn)有藥物設(shè)計(jì)程序提供了一套理論基礎(chǔ)，其臨床價(jià)值將逐漸顯現(xiàn)：小分子藥物能夠穿越大分子越不過(guò)的屏障。
“藥物設(shè)計(jì)是個(gè)‘配鑰匙’的過(guò)程。人們已知一個(gè)疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，想設(shè)計(jì)一種反向性的藥物，需要有機(jī)化學(xué)家、計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)的理論化學(xué)家等一起構(gòu)筑一個(gè)和蛋白質(zhì)活性中心匹配的足夠大的鑰匙才能工作。”王晨軒對(duì)記者解釋?zhuān)幬锓肿釉介L(zhǎng)合成越難，而且到了產(chǎn)業(yè)化的時(shí)候?qū)に嚨囊蟾侵笖?shù)級(jí)的增加。如果藥物其實(shí)只需要合成原來(lái)的1/4或者是1/8，那么難度將大大降低。在進(jìn)入身體里發(fā)揮功效時(shí)，也會(huì)事半功倍。
“小分子到體內(nèi)，能夠穿過(guò)一些大分子過(guò)不去的屏障。”王晨軒介紹，比如一個(gè)抗腫瘤的藥物，要進(jìn)入實(shí)體瘤是很困難的。因?yàn)閷?shí)體瘤內(nèi)部高度液化，壓強(qiáng)非常大，大分子根本無(wú)法抵達(dá)，但小分子就不一樣了，能夠自由擴(kuò)散，直接到達(dá)作用位點(diǎn)，組裝后再起作用，將起到更好的療效。
“我們清楚地在顯微鏡中觀察到藥物分子的4種寡聚態(tài)，這提示我們藥物設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)考量藥物團(tuán)簇時(shí)發(fā)揮作用的基本單元。”王晨軒說(shuō)，所以藥物設(shè)計(jì)應(yīng)該把分子之間的作用考慮進(jìn)去。
具體到實(shí)際工作中，王晨軒認(rèn)為還有很多理論需要完善。例如，當(dāng)我們進(jìn)行藥物篩查時(shí)，需證明它和蛋白質(zhì)相互作用的方法。“我們同時(shí)需要明確藥物分子結(jié)合所需的能量，這樣就可以通過(guò)能量來(lái)控制分子是以二聚體形式還是其它寡聚態(tài)形式存在。”王晨軒說(shuō)。要大大簡(jiǎn)化現(xiàn)有的藥物設(shè)計(jì)程序還有很長(zhǎng)的路要走。王晨軒說(shuō)，這張顯微鏡照片證明了這個(gè)路徑的可行性。團(tuán)隊(duì)的研究提供了一套理論基礎(chǔ)，但具體如何實(shí)現(xiàn)，如何在此基礎(chǔ)上理論聯(lián)系實(shí)際，真正運(yùn)用到臨床藥物的研發(fā)中，還需要做很多工作。
建筑學(xué)有LESS IS MORE(少即是多、簡(jiǎn)單就是美)的理念。首張“藥物擊靶”顯微鏡照告訴我們，這個(gè)理念對(duì)于藥物設(shè)計(jì)或許同樣適用。
